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產(chǎn)品展示

MMC Focurose HPL

價(jià) 格:詢價(jià)

規(guī) 格:25ml/100ml/500ml/1L/5L/20L

產(chǎn) 地:中國

貨 號(hào):HF220305001L

品 牌:匯研生物


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產(chǎn)品概述

    為確保產(chǎn)品的性能和無憂的操作,使用前請仔細(xì)閱讀本手冊,有任何疑問請咨詢本公司技術(shù)支持或當(dāng)?shù)氐匿N售人員。

    MMC Focurose HPL是一種多模式耐鹽生物分離介質(zhì),適用于蛋白、多肽、核酸等所有帶電的生物分子的中度純化和精細(xì)純化。


產(chǎn)品

圖1:MMC Focurose HPL的配基是一種多模式配基,它與目標(biāo)分子存在許多類型的相互作用,主要是離子作用,其次是氫鍵作用和疏水作用等。

 

特點(diǎn):

a.在高電導(dǎo)條件下結(jié)合帶電分子,樣本不再受電導(dǎo)的限制,樣本不需要前處理就可進(jìn)行離子交換。

b.處理樣本體積大。

c.和傳統(tǒng)離子交換介質(zhì)相比,具有新的選擇性。

d.大孔徑。

表1:MMC Focurose HPL 性能參數(shù)

名稱

MMC Focurose HPL

基質(zhì)

高剛性瓊脂糖

粒徑范圍

45-165μm

平均粒徑

≈75μm

介質(zhì)類型

復(fù)合模式

離子載量

80-120umol H+/ml 介質(zhì)

pH穩(wěn)定性

2-14(短期)3-12(長期)

操作壓力

≤0.3MPa

最大流速

300cm/h

化學(xué)穩(wěn)定性

所有常用緩沖液、1.0M氫氧化鈉、8M尿素、6M鹽酸胍、70%乙醇

避免使用氧化劑、陽離子去污劑、陽離子緩沖液

貯存溶液

20%乙醇

貯存溫度

4-30℃

 

1 選擇指導(dǎo)

2.1 離子交換介質(zhì)的選擇

圖2:離子交換介質(zhì)的選擇

 

說明:

a.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí),選擇陽離子交換介質(zhì)。

b.當(dāng)目標(biāo)物所在溶液的pH?目標(biāo)物的等電點(diǎn)時(shí),選擇陰離子交換介質(zhì)。

c.所使用溶液的pH應(yīng)該在離子交換介質(zhì)的使用pH范圍以內(nèi)。

2.2 緩沖溶液的選擇

表2:推薦緩沖液

pH范圍

緩沖鹽1

濃度2(mM)

4.0-5.5

Acetate

20-100

3.0-6.5

Citrate

20-200

5.5-6.5

Bis-Tris

20-50

6.0-7.5

Phosphate

20-200

7.5-9.0

Tris

20-50

8.8-10.6

Glycin-NaOH

20-100

 

說明:

a.選擇的緩沖液和鹽可能會(huì)干擾性能。

b.電導(dǎo)調(diào)節(jié)可以通過添加鹽或改變緩沖液的濃度。

c.在溶液配制后,須經(jīng)過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用0.8μm過濾)和脫氣處理(超聲或負(fù)壓)。

 

3 樣品的制備

樣品所在溶液要和平衡液保持一致,可以用平衡液稀釋或透析/超濾/G25進(jìn)行緩沖液置換。

樣品過濾(平均粒徑<45μm,用0.22μm過濾;45μm<平均粒徑<165μm,用0.45μm過濾;平均粒徑>165μm,用   0.8μm過濾)。

 

4 純化流程(以XK16/10為例)

采用液滴對液滴(避免引入氣泡)的方式將柱子連接到層析系統(tǒng)上。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV(CV指柱床體積,下同)。

用洗脫液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

將樣品以5ml/min的流速上樣。

用平衡液以5ml/min的流速?zèng)_洗10CV。

用洗脫液以5ml/min洗脫5CV或20CV(根據(jù)前期篩選實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),采用階梯式洗脫5CV/線性梯度洗脫20CV)。

用再生液以5ml/min的流速?zèng)_洗5CV。

備注:再生液=平衡液+2M NaCl,其它組分不變。

 

5 放大

保持柱床高度不變

5.2 保持線性流速不變

備注:若實(shí)際情況和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)有偏差,可以維持停留時(shí)間不變。


6 維護(hù)

6.1平衡

柱子裝填完成后,用平衡液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.2再生

每次分離純化后,用再生液以60cm/h的流速?zèng)_洗5CV或沖洗至電導(dǎo)和pH值恒定。

6.3在位清洗

在位清洗用于清洗再生沒有清洗干凈的物質(zhì),例如脂類、沉淀物、變性蛋白。

a.強(qiáng)離子結(jié)合蛋白

用2.0M NaCl以60cm/h的流速反向沖洗5CV。

b.沉淀物、疏水結(jié)合蛋白、脂蛋白

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

c.脂類、強(qiáng)疏水蛋白。

用1.0M NaOH,30%異丙醇以30cm/h的流速反向沖洗5CV

6.4消毒

用1.0M NaOH以30cm/h的流速反向沖洗5CV。

6.5滅菌

將介質(zhì)置換到0.5M NaCl ,pH 7.0的溶液中進(jìn)行高壓滅菌。

6.6保存

介質(zhì)在20%乙醇中4-30℃保存。

 

7 訂購信息

表3:訂購信息表

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號(hào)

MMC Focurose HPL

25ml

HF220305025M

MMC Focurose HPL

100ml

HF220305100M

MMC Focurose HPL

500ml

HF220305500M

MMC Focurose HPL

1L

HF220305001L

MMC Focurose HPL

5L

HF220305005L

MMC Focurose HPL

20L

HF220305020L

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MMC Focurose HPL

MMC Focurose HPL

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